DOI： 10.3390/ijms26135955

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DOI： 10.3390/cancers17132212

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DOI： 10.3390/nu17040645

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<p>The use of alternative <i>in vitro</i> methods for assessing acute inhalation toxicity instead of animal testing is currently an important issue and aligns with the 3Rs concept (reduction, refinement, and replacement). This study aimed to develop a neutral red uptake (NRU) assay using human lung adenocarcinoma cells (A549-NRU) to predict acute inhalation toxicity in animal models. LC₅₀ values of 49 chemicals were evaluated and their correlations with LD₅₀ values from 4-hour rat inhalation studies were analyzed. The LC₅₀ values from A549-NRU showed significantly negative correlation with their physicochemical properties (molecular weight and octanol-water partition coefficient). A significantly positive correlation between LC₅₀ values from A549-NRU and LD₅₀ values from 4-hour rat inhalation of water-soluble chemicals was observed. Among all chemicals, those containing aldehyde and ketone groups, as well as chemicals containing alcohol, ether, and epoxide groups, exhibited significant positive correlation between LC₅₀ values from A549-NRU and LD₅₀ values from 4-hour rat inhalation. Furthermore, compared to the standard NRU assay using mouse fibroblast cells (3T3), the LC₅₀ values from the A549-NRU assay exhibited stronger positive correlation with the LD₅₀ values from 4-hour rat inhalation studies. These findings indicate that physicochemical properties and chemical structures are key determinants in the A549-NRU assay, supporting its potential as a promising <i>in vitro</i> alternative for predicting acute inhalation toxicity in rats.</p>

DOI： 10.14869/toxpt.52.1.0_p-391

CiNii Research

DOI： 10.1293/tox.2024-0087

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DOI： 10.1293/tox.2024-0042

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CiNii Research

DOI： 10.1093/toxsci/kfae119

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DOI： 10.1002/adtp.202400348

DOI： 10.1016/j.jff.2024.106391

DOI： 10.1007/s00204-024-03755-w

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DOI： 10.1007/s00204-024-03750-1

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DOI： 10.3390/biom14010036

<p>【目的】</p><p>毒物又は劇物は、原則として動物を用いた急性毒性試験におけるLD50・LC50値から判定されており、投与方法には経口、経皮及び吸入が想定されている。一方、近年は<i>in vitro</i>試験等に基づく、毒性や刺激性等から判断する評価法も希求されている。そこで、本研究ではラットを用いた被験物質の経気管肺内噴霧投与法(Trans-tracheal intrapulmonary spraying；TIPS法)を行う際の<i>in vitro</i>投与量設定法として、細胞毒性評価法として使用されているマウス線維芽細胞 3T3を用いたNeutral Red Uptake Cytotoxicity Assay(OECD GD 129)を一部改変し、ヒト肺腺癌細胞株A549を用いた改変Neutral Red Uptake assay (A549 NRU assay)を構築し、試験プロトコールの最適化とその有用性について検討を行った。</p><p></p><p>【方法】</p><p>30種類の被験物質について、それぞれA549 NRU assayを実施し、IC50を算出した。さらに6物質(Acetylacetone、1,2-Dichloroethane、N,N-Dimethylacetamide、N-Dimethylformamide、Glycidol及びPolyacrylic Acid 5000)については、TIPS法で得られたLD50と比較し、A549 NRU assayで得られたIC50値との相関を検討した。</p><p></p><p>【結果と考察】</p><p>A549 NRU assayを用いて30物質の本試験におけるIC50を算出し、良好な再現性も確認できた。うち6物質ではTIPS法でのLD50値と高い相関が得られた。以上より、TIPS法の<i>in vitro</i>投与量設定試験としてA549 NRU assayを構築することができた。</p>

DOI： 10.14869/toxpt.51.1.0_p-299

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